Atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos: enfrentamento de bactérias de interesse odontológico (2023)
- Authors:
- Autor USP: SILVA, LETÍCIA DE SOUZA MODA - FORP
- Unidade: FORP
- Subjects: BACTERIÓFAGOS; ANTIBIÓTICOS; INFECÇÃO FOCAL DENTÁRIA
- Keywords: Bactérias de interesse odontológico; Resistência bacteriana; Fagoterapia; Bacteriophages; Bacteria of dental interest; Infection-resistant bacterial; Antibiotics; Phage therapy
- Agências de fomento:
- Language: Português
- Abstract: O objetivo deste estudo foi avaliar in vitro a atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos no enfrentamento de bactérias de interesse odontológico e o desenvolvimento de resistência bacteriana às infecções fágicas, após exposições sucessivas aos bacteriófagos. A atividade antibacteriana de bacteriófagos líticos (vB_PaeM_USP_1, vB_PaeM_USP_2, vB_PaeM_USP_3, vB_PaeM_USP_18 e vB_PaeM_USP_25) foi avaliada contra cepas padrão de Pseudomonas aeruginosa (ATCC 27853), Escherichia coli (ATCC 25927), Enterococcus faecalis (ATCC 29212) e Staphylococcus aureus (ATCC 6538). Os fagos foram cultivados na presença da bactéria hospedeira em fase exponencial de crescimento, purificados e titulados. Na titulação (1ª exposição), a presença de áreas de lise foi avaliada, através de halos transparentes e equidistantes, sem sobreposição. Na parte interna dos halos evidenciou-se a presença de colônias bacterianas resistentes. As placas de lise foram contadas e os valores expressos em unidades formadoras de placa por mililitro (UFP/mL). Alíquotas de 20 μL de cada bacteriófago (~108 UFP/mL, ~1010 UFP/mL e ~1013 UFP/mL) foram gotejadas sobre a superfície do meio de cultura triptona de soja (TS) semissólido a 0,8% inoculado com 106 UFC/mL de P. aeruginosa. Colônias bacterianas resistentes à infecção foram registradas na parte interna dos halos (2ª exposição). As colônias de P. aeruginosa resistentes foram isoladas, cultivadas em caldo TS e reexpostas aos bacteriófagos (3ª exposição). A área em contato com os bacteriófagos que apresentou crescimento (~108 UFP/mL) foi coletada, e as cepas resistentes avaliadas quanto à suscetibilidade a diferentes antibióticos pela técnica de disco difusão. Os diâmetros dos halos de inibição foram avaliados com o software Image J e o perfil de susceptibilidade aos antibióticos determinado conforme os critérios do Clinical and Laboratory Standards Institute. Catorze coquetéisdiferentes, compostos de 100 μL de cada fago, foram empregados para avaliar a emergência de resistência à infecção por coquetel de bacteriófagos. Alíquotas de 20 μL de cada coquetel (~108 UFP/mL, ~1010 UFP/mL e ~1013 UFP/mL) foram gotejados sobre a superfície do meio de TS semissólido inoculado com 106 UFC/mL de P. aeruginosa resistentes. As placas foram incubadas a 37°C por 24h. Os bacteriófagos demonstraram especificidade por P. aeruginosa e não infectaram E. coli, E. faecalis e S. aureus. Na 2ª exposição, o crescimento de colônias resistentes à infecção foi observado. As colônias isoladas e reexpostas (3ª exposição) foram amplamente resistentes e nenhuma placa de lise foi observada. No ensaio de suscetibilidade, o desenvolvimento de resistência não alterou o perfil de susceptibilidade de P. aeruginosa aos antibióticos. Na avaliação da emergência de resistência à infecção pelos coquetéis (~108 UFP/mL, ~1010 UFP/mL, ~1013 UFP/mL), a resistência à infecção foi confirmada devido ao crescimento de colônias resistentes nos halos. Em conclusão, os bacteriófagos demonstraram especificidade por P. aeruginosa e não infectaram E. coli, E. faecalis e S. aureus. Variantes de P. aeruginosa resistentes à infecção fágica foram isoladas após a 1a exposição, e a resistência à infecção por coquetel de bacteriófagos foi evidenciada, independentemente do título viral utilizado. Apesar do surgimento de variantes bacterianas resistentes, novos estudos da aplicabilidade de bacteriófagos no controle de infecções devem ser conduzidos
- Imprenta:
- Publisher place: Ribeirão Preto
- Date published: 2023
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ABNT
SILVA, Letícia de Souza Moda. Atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos: enfrentamento de bactérias de interesse odontológico. 2023. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2023. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/144b9833-78f5-476d-85d6-a8f497ec4cb7/003243409.pdf. Acesso em: 22 abr. 2025. -
APA
Silva, L. de S. M. (2023). Atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos: enfrentamento de bactérias de interesse odontológico (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/144b9833-78f5-476d-85d6-a8f497ec4cb7/003243409.pdf -
NLM
Silva L de SM. Atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos: enfrentamento de bactérias de interesse odontológico [Internet]. 2023 ;[citado 2025 abr. 22 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/144b9833-78f5-476d-85d6-a8f497ec4cb7/003243409.pdf -
Vancouver
Silva L de SM. Atividade antibacteriana de bacteriófagos inéditos: enfrentamento de bactérias de interesse odontológico [Internet]. 2023 ;[citado 2025 abr. 22 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/144b9833-78f5-476d-85d6-a8f497ec4cb7/003243409.pdf
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