Modificação genética de Pseudomonas para a produção de 3-hidroxialcanoatos a partir da introdução do gene codificador de tioesterases II (2023)
- Authors:
- Autor USP: OLIVEIRA, VITAL PEGORIN - FCF
- Unidade: FCF
- Assunto: BIOLOGIA MOLECULAR
- Keywords: Engenharia Metabólica; 3-hidroxiácido; 3-hidroxialcanoato; Bioprodução
- Language: Português
- Abstract: INTRODUÇÃO: Os (R)-3-hidroxialcanoatos (3HAs) são uma classe diversa de moléculas quirálicas de difícil obtenção e alto valor agregado, que podem ser produzidos por sínteses químicas, mas, principalmente, por vias biotecnológicas. Tão diversas quanto suas estruturas são suas aplicações, que podem variar de aditivos de combustível, precursores de síntese para bioplásticos, e produtos de interesse farmacêutico e hospitalar, como antimicrobianos, antitumorais e insumos para a alimentação de pacientes acamados. A produção industrial destes compostos, por sua vez, é limitada, e sua presença no mercado é quase nula. Mas a ampliação da sua produção pode servir como incentivo mercadológico para a estruturação de uma indústria de moléculas de alto valor agregado mais ecológica, e promover a circularização da economia. OBJETIVO: Modificar geneticamente bactérias do gênero Pseudomonas para a criação de uma nova via metabólica que produza 3HAs, com a introdução de genes codificadores da enzima tioesterase II (tesB) e a expressão das enzimas codificadas pelos mesmos. Com isso visa-se melhorar a compreensão dos mecanismos por trás da produção destes metabólitos. MATERIAIS E MÉTODOS: A construção dos plasmídeos ocorreu a partir da clonagem com enzimas de restrição de genes obtidos por PCR genômico em plasmídeos. Os plasmídeos foram inseridos em E. coli que apresentam capacidade conjugativa por eletroporação, e as Pseudomonas foram transformadas a partir da sua conjugação com estas E. coli. O cultivo das linhagens obtidas ocorreu em agitador rotativo por 72h e, ao final, foram analisados a formação de biomassa, a produção de polihidroxialcanoatos (PHA), a produção de 3HAs e o pH do meio. RESULTADOS: A inserção do plasmídeo e a expressão da enzima TesB afetaram o metabolismo das bactérias,permitindo a produção de até 467,4 mg/L de 3HA, mas afetando seu crescimento e pH do meio. As características dos monômeros produzidos também variaram de linhagem para linhagem, e dependeram das enzimas codificadas nos plasmídeos. CONCLUSÃO: A produção de 3HAs por esta via é possível, porém apresenta diversos pontos a serem levados em consideração quando se pensa nessa fabricação destes compostos, como a cepa de bactéria a ser utilizada, o meio de cultivo e a enzima a ser clonada
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ABNT
OLIVEIRA, Vital Pegorin. Modificação genética de Pseudomonas para a produção de 3-hidroxialcanoatos a partir da introdução do gene codificador de tioesterases II. 2023. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo, 2023. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/04ad0ed4-45da-4c25-aac7-491fcd511b3a/TCC_Vital_Pegorin_Oliveira.pdf. Acesso em: 17 mar. 2025. -
APA
Oliveira, V. P. (2023). Modificação genética de Pseudomonas para a produção de 3-hidroxialcanoatos a partir da introdução do gene codificador de tioesterases II (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Faculdade de Ciências Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, São Paulo. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/04ad0ed4-45da-4c25-aac7-491fcd511b3a/TCC_Vital_Pegorin_Oliveira.pdf -
NLM
Oliveira VP. Modificação genética de Pseudomonas para a produção de 3-hidroxialcanoatos a partir da introdução do gene codificador de tioesterases II [Internet]. 2023 ;[citado 2025 mar. 17 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/04ad0ed4-45da-4c25-aac7-491fcd511b3a/TCC_Vital_Pegorin_Oliveira.pdf -
Vancouver
Oliveira VP. Modificação genética de Pseudomonas para a produção de 3-hidroxialcanoatos a partir da introdução do gene codificador de tioesterases II [Internet]. 2023 ;[citado 2025 mar. 17 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/04ad0ed4-45da-4c25-aac7-491fcd511b3a/TCC_Vital_Pegorin_Oliveira.pdf
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