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Avaliação in vitro da adesão, proliferação e expressão de proteínas por meio de imunofluorescência de células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem Raw 264.7 (2022)

  • Authors:
  • USP affiliated author: CASSIANI, MARINA CORREIA - FORP
  • School: FORP
  • Subjects: MACRÓFAGOS; OSTEOBLASTO; OSTEOGÊNESE
  • Keywords: Meio condicionado; Macrophages; Osteoblasts; Conditioned medium
  • Agências de fomento:
  • Language: Português
  • Abstract: A osteogênese é alcançada não somente por células osteoblásticas do sistema esquelético, mas também como resultado de uma cooperação com múltiplos sistemas, entre eles, o imune. Células como macrófagos liberam várias moléculas sinalizadoras que poderiam afetar positiva ou negativamente a capacidade osteogênica dos osteoblastos. Sendo assim, o objetivo do presente projeto foi avaliar a influência do meio condicionado de células da linhagem de macrófagos murinos RAW 264.7 polarizadas em M1 por meio de lipopolissacarídeos (LPS), na cultura de células osteoblásticas murinas MC3T3-E1. Após a armazenamento do meio condicionado, as células osteoblásticas foram cultivadas em garrafas em meio de cultura osteogênico até a subconfluência e plaqueadas em uma concentração de 2 x 104 células por poço em placas de cultura (n=5) com lamínulas de vidro já posicionadas e adequadas para a adesão e proliferação das células. Os grupos experimentais foram divididos em células controles (C) e células tratadas com 50% de meio condicionado de macrófagos (MC). Após os tempos experimentais, foram avaliados os seguintes parâmetros: adesão e proliferação celular, além da expressão das proteínas fosfatase alcalina (ALP), sialoproteína óssea (BSP) e osteopontina (OPN) por meio de imunofluorescência. Os dados numéricos obtidos foram analisados por programas estatísticos adequados para p ≤ 0.05. A adesão celular foi maior para o grupo MC apesar de ausência de significância estatística. A análise qualitativa com marcador Ki-67 revelou maior proliferação celular no grupo MC. A imunolocalização das proteínas ALP e BSP foi similar entre os grupos e maior no grupo MC para a proteína OPN. Os resultados sugerem que a presença do meio condicionado de macrófagos possa estimular a adesão e a atividade funcional de células osteoblásticas
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    • ABNT

      CASSIANI, Marina Correia. Avaliação in vitro da adesão, proliferação e expressão de proteínas por meio de imunofluorescência de células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem Raw 264.7. 2022. Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação) – Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, 2022. Disponível em: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/017949e7-6135-4edf-8c5a-b2cbf7c3ebb6/Marina_Correia_Cassiani.pdf. Acesso em: 29 mar. 2024.
    • APA

      Cassiani, M. C. (2022). Avaliação in vitro da adesão, proliferação e expressão de proteínas por meio de imunofluorescência de células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem Raw 264.7 (Trabalho de Conclusão de Curso (Graduação). Faculdade de Odontologia de Ribeirão Preto, Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto. Recuperado de https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/017949e7-6135-4edf-8c5a-b2cbf7c3ebb6/Marina_Correia_Cassiani.pdf
    • NLM

      Cassiani MC. Avaliação in vitro da adesão, proliferação e expressão de proteínas por meio de imunofluorescência de células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem Raw 264.7 [Internet]. 2022 ;[citado 2024 mar. 29 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/017949e7-6135-4edf-8c5a-b2cbf7c3ebb6/Marina_Correia_Cassiani.pdf
    • Vancouver

      Cassiani MC. Avaliação in vitro da adesão, proliferação e expressão de proteínas por meio de imunofluorescência de células osteoblásticas MC3T3-E1 cultivadas com meio condicionado de macrófagos da linhagem Raw 264.7 [Internet]. 2022 ;[citado 2024 mar. 29 ] Available from: https://bdta.abcd.usp.br/directbitstream/017949e7-6135-4edf-8c5a-b2cbf7c3ebb6/Marina_Correia_Cassiani.pdf

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